MetilFlash Metilación global del ADN

El MethylFlash ™ Global DNA Methylation (5-mC) ELISA Easy Kit es un conjunto completo de tampones y reactivos optimizados para cuantificar colorimétricamente el estado de metilación global del ADN mediante la medición específica de los niveles de 5-metilcitosina (5-mC) en un formato simplificado. Se trata de una reacción de “un solo paso” similar a ELISA. Esto permite medir directamente la metilación global del ADN con mayor rapidez que otras técnicas como los ensayos basados en LUMA, LINE-1, Alu o LTR.

Paraffin Wax
Toronto Research Chemicals
Paraffin wax pellets
EWC Diagnostics
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EWC Diagnostics
Paraffin wax Pellets
EWC Diagnostics
Paraffin wax Pellets
EWC Diagnostics

Como tecnología de cuarta generación de la técnica de metilación global del ADN propiedad de EpigenTek, supone un perfeccionamiento del popular kit predecesor MethylFlash al mejorar la velocidad, simplicidad, sensibilidad y reproducibilidad. Este kit también está optimizado específicamente para su uso junto con el kit MethylFlash Global DNA Hydroxymethylation (5-hmC) ELISA Easy (colorimétrico) para cuantificar simultáneamente tanto el ADN metilado como el hidroximetilado.

MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR MASTITIS PCR kit
Bioingentech
PCR-EZ D-PCR MASTER MIX
Bio Basic
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech
MULTIPLEX KIT PCR Babesia & Theileria PCR kit
Bioingentech

Uso de una pista de pádel para programas de terapia y terapia deportiva

Este kit presenta las siguientes ventajas y características

  • Rápido: pasos reducidos de modo que el procedimiento completo sólo dura 2 horas.
  • Robusto: la composición mejorada del kit permite que el ensayo tenga una “ventana de señal” más amplia con una variación reducida entre réplicas
  • Cómodo: ruido de fondo inherentemente bajo, lo que elimina la necesidad de pasos de desnaturalización del ADN y bloqueo de la placa
    Sensible: el límite de detección puede ser tan bajo como 0,05% de ADN metilado a partir de 100 ng de ADN de entrada
  • Específico: alta especificidad para 5-mC, sin reactividad cruzada con citosina no metilada, y sin reactividad cruzada con hidroximetilcitosina dentro del rango de concentración indicado del ADN de muestra
  • Universal: Se incluyen controles positivos y negativos que permiten la detección de la metilación del ADN en cualquier especie a partir de ADN de entrada monocatenario o bicatenario
  • Preciso: controles positivos optimizados que pueden fraccionarse en una escala porcentual, lo que permite que el ensayo sea más preciso y altamente comparable con el análisis HPLC-MS
  • Flexible – El formato de microplaca en tiras de pocillos hace que el ensayo esté disponible para análisis manuales o de alto rendimiento.
Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Rat Cholesterol ELISA ELISA
E02C0745-48wellsplate BlueGene
Rat Cholesterol ELISA ELISA
E02C0745-96wellsplate BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
E01A46041 BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
E06C0745-48wellsplate BlueGene

Antecedentes

La metilación del ADN se produce por la adición covalente de un grupo metilo en el carbono 5 del anillo de citosina por parte de las ADN metiltransferasas, dando lugar a la 5-metilcitosina (5-mC). En las células somáticas, la 5-mC se encuentra casi exclusivamente en el contexto de la metilación simétrica pareada del dinucleótido CpG, mientras que en las células madre embrionarias (ES), también se observa una cantidad sustancial de 5-mC en contextos no CpG. . Los niveles de 5-mC son variables en los genomas animales, desde cantidades indetectables en algunos insectos hasta alrededor del 2% del ADN total de invertebrados.

Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa
Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa
Protein-Export Protein SecB (SecB) Protein
Abbexa

El nivel de 5-mC en las plantas suele representar entre el 0,5 y el 2% y puede llegar al 8% del ADN total en algunas otras especies. La importancia biológica de la 5-mC como importante modificación epigenética en el fenotipo y la expresión génica ha sido ampliamente reconocida. Por ejemplo, la disminución global del contenido de 5-mC (hipometilación del ADN) está probablemente causada por la deficiencia de metilo debida a diversas influencias ambientales, y se ha propuesto como marcador molecular en múltiples procesos biológicos como el cáncer.

Rat Cholesterol ELISA ELISA
E01A11128 BlueGene
Goat Cholesterol ELISA ELISA
E01A46041 BlueGene

Está bien establecido que la disminución de la metilación global del ADN es una de las características más importantes del cáncer. Algunos nuevos nucleótidos modificados, la 5-hidroximetilcitosina (5-hmC), la 5-formilcitosina (5-fC) y la 5-carboxitosina (5-caC) se han detectado en tejidos humanos y de ratón, así como en células madre embrionarias. En los mamíferos, estos nucleótidos modificados pueden generarse por oxidación iterativa de la 5-metilcitosina, una reacción mediada por la familia de enzimas TET.

variable Volume 0,1 -2,5 µl
-LHP1-V01 Phoenix instrument
variable volume 0,5 -10 µl
-LHP1-V05 Phoenix instrument
variable volume 10 -100 µl
-LHP1-V10 Phoenix instrument
variable volume 100-1000 µl
-LHP1-V100 Phoenix instrument
variable volume 1000 -5000 µl
-LHP1-V1000 Phoenix instrument

Principio y procedimiento

Este kit contiene todos los reactivos necesarios para la cuantificación de la metilación global del ADN. En este ensayo, el ADN se une a los pocillos de tiras que se tratan específicamente para tener una alta afinidad por el ADN. La fracción metilada del ADN se detecta usando anticuerpos de captura y detección y luego se cuantifica colorimétricamente leyendo la absorbancia en un espectrofotómetro de microplaca. El porcentaje de ADN metilado es proporcional a la intensidad de DO medida.

variable Volume 0,1 -2,5 µl
-LHP1-V01 Phoenix instrument
variable volume 0,5 -10 µl
-LHP1-V05 Phoenix instrument
variable volume 10 -100 µl
-LHP1-V10 Phoenix instrument
variable volume 100-1000 µl
-LHP1-V100 Phoenix instrument

Materiales para empezar

El ADN de entrada debe ser relativamente puro con una relación 260/280> 1,6 y puede diluirse con agua o tampón TE. La cantidad de ADN puede oscilar entre 20 ng y 200 ng por reacción. Sin embargo, recomendamos utilizar 100 ng de ADN, que es la cantidad de entrada optimizada para obtener los mejores resultados. El ADN puede aislarse de cualquier especie, como mamíferos, plantas, hongos, bacterias y virus, en una variedad de formas que incluyen, entre otras, células cultivadas, tejidos frescos y congelados, tejidos incluidos en parafina, muestras de plasma/suero y muestras de fluidos corporales. Tanto el ADN monocatenario como el ADN bicatenario con un tamaño de 200 pb en toda su longitud son adecuados para su uso.

Fuentes :

  1. Gentaur
  2. NCBI
variable Volume 0,1 -2,5 µl
Phoenix instrument
variable volume 0,5 -10 µl
Phoenix instrument
variable volume 10 -100 µl
Phoenix instrument
variable volume 100-1000 µl
Phoenix instrument
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